アフィニティー担体

概要

生体分子のアフィニティー精製用に Ready-to-use 担体、活性化担体、およびプロテイン A 担体が用意されています。

	マトリックス	ファンクショナルグループ	特異性	容量	作用 pH	圧力限界	用途
Ready-to-Use アフィニティー担体
UNOsphere SUPrA	高架橋ポリアクリルアミドゲルポリマー	リコンビナントタンパク質 A	免疫グロブリン/抗体	25 ～ 30 mg/ml<	3 ～ 11	100 ～ 600 cm/hr	モノクローナル抗体精製
Profinity IMAC	UNOsphere ビーズを主成分とする耐圧性ポリマー	IDA、Ni²⁺ による荷電および非荷電を提供	ヒスチジン	≥15 mg/ml*	1 ～ 14	100 psi (6.8 bar)	リコンビナント His タグタンパク質の精製、他の遷移金属で荷電できます
Profinity GST	UNOsphere ビーズを主成分とする耐圧性ポリマー	固定化グルタチオン	GST タグタンパク質	≥10 mg/ml	1 ～ 14	45 psi (3.1 bar)	リコンビナント GST タグタンパク質の精製
Profinity eXact	架橋した 6% アガロース	スブチリシンプロテアーゼ	スブチリシンのプロドメイン	≥3 mg/ml タグフリータンパク質	2 ～ 10	10 psi (負のシステム圧)	カラム上での精製と切断による Native タグフリータンパク質の生成
アフィゲルプロテイン A	架橋アガロース	プロテイン A 2 mg/ml	IgG		2 ～ 10	15 psi (1 bar)	腹水、血清、培養液からの IgG の精製。MAPS バッファーシステムを使用して、ゲル 1 ml につき 10 mg のマウス IgG を精製することができます₁
アフィプレッププロテイン A	耐圧性ポリマー	プロテイン A 2 mg/ml	IgG		2 ～ 10	1,000 psi (70 bar)	腹水、血清、培養液から精製された IgG。プロセススケールでの適用に対する耐圧性サポート
アフィゲルブルー	架橋アガロース	Cibacron Blue F3GA 1.9 mg/ml	アルブミン: 一般	≥11 mg/ml	2 ～ 10	15 psi (1 bar)	多くのヌクレオチド要求酵素、アルブミン、およびその他のタンパク質を結合します
DEAE アフィゲルブルー	架橋アガロース	Cibacron Blue F3GA および DEAE	アルブミンおよび血清タンパク質	0.14 ml 血清/ml ゲル	2 ～ 10	15 psi (1 bar)	最小限のサンプル調製で腹水、血清、培養液からプロテアーゼの含まれない IgG を精製します
CM アフィゲルブルー	架橋アガロース	Cibacron Blue F3GA および CM	アルブミンおよび血清タンパク質	0.17 ～ 0.5 ml 血清/ml ゲル	2 ～ 11	15 psi (1 bar)	事前の透析なしで血清からアルブミンおよびプロテアーゼの含まれない抗体を調製します
アフィプレップポリミキシン	耐圧性ポリマー	ポリミキシン 2–4 mg/ml	エンドトキシン	>5 mg/ml	2 ～ 10	1,000 psi (70 bar)	エンドトキシン除去
アフィゲル Boronate	ポリアクリルアミドゲル	Boronate 1.05±0.15	cis-diol meq/g	130 µモルソルビトール/ml	2 ～ 10	15 psi (1 bar)	cis-ヒドロキシル基含有分子 (糖類、ヌクレオチド、グリコペプチドなど) の吸着作用
自発的なリガンド固定化のための活性化担体
Profinity Epoxide	UNOsphere ビーズを主成分とする耐圧性ポリマー	エポキシ基	求核剤: アミン、チオール、-COOH	36 ～ 40 mg/ml IgG	1 ～ 14	最大 80 psi (5.5 bar)	様々なリガンドの固定用に活性化されたマトリックス (例: プロテイン A、StrepTactin、および免疫グロブリン)
アフィゲル 10	架橋アガロース	N-ヒドロキシ-スクシンイミド ≥10 µmol/ml	-NH₂	35 mg/ml	3 ～ 11	15 psi (1 bar)	pl 6.5 ～ 11 のカップリングタンパク質用
アフィゲル 15	架橋アガロース	N-ヒドロキシ-スクシンイミド ≥9 µmol/ml	-NH₂	35 mg/ml	3 ～ 11	15 psi (1 bar)	pl <6.5 のカップリングタンパク質用
アフィゲル Hz	架橋アガロース	ヒドラジド	酸化された炭水化物	1 ～ 5 mg/ml	2 ～ 10	15 psi (1 bar)	免疫グロブリンおよび他の糖タンパク質の炭水化物構成成分による固定化
カルボジイミド活性化を使用したアフィニティー担体
アフィゲル 102	架橋アガロース	-NH₂ 16 ± 4 meq/ml	-COOH	40 mg	2 ～ 11	15 psi (1 bar)	カルボキシル基を含むリガンドのカルボジイミドカップリング

* 精製条件については、Bulletin 3193 を参照してください。

モノクローナル抗体の精製

Profinity IMAC 樹脂

UNOsphere SUPrA 担体

Profinity eXact 樹脂

Profinity eXact Purification Resin の化学的適合性。*
溶解液	細菌の溶解および抽出試薬 (バイオ・ラッド) リン酸塩バッファー中の B-PER タンパク質抽出試薬 (Pierce Biotechnology, Inc.) トリスバッファー中の B-PER タンパク質抽出試薬* (Pierce) BugBuster タンパク質抽出試薬 (Novagen, Inc.) FastBreak 細胞溶解試薬 (Promega Corporation)
プロテアーゼインヒビター	1x protease inhibitor cocktail (BD Biosciences Pharmingen) 2x protease inhibitor cocktail セット 1 (Merck UK: Calbiochem) Complete Protease Inhibitor Cocktail Tablet (ロッシュ) 0.5 mM PMSF 0.1 mM TLCK 0.1 mM TPCK
界面活性剤	5% (v/v) Triton X-100 5% (v/v) NP-40 5% (v/v) Tween 20 5% (w/v) オクチルチオグルコシド 5% (w/v) n-ドデシル B-D-マルトシド 5% (w/v) CHAPS 5% (w/v) CHAPSO
還元剤	20 mM β-メルカプトエタノール 10 mM DTT 5 mM TCEP
キレート試薬	20 mM EDTA 20 mM EGTA
バッファー試薬	50 mM のトリス-Acetate、pH 7.2 50 mM トリスリン酸、pH 7.2 50 mM の HEPES、pH 7.2 50 mM の PIPES、pH 7.2 50 mM の MOPS、pH 7.2 50 mM の MES、pH 7.2
添加剤	20% (v/v) グリセロール 20% (v/v) エチレングリコール 20% (v/v) エタノール 20% (w/v) ソルビトール 20% (w/v) スクロースイミダゾール 200 mM 200 mM の酢酸ナトリウム 100 mM ホウ酸ナトリウム 100 mM クエン酸ナトリウム 100 mM 硫酸ナトリウム 15% (w/v) 硫酸アンモニウム 5% (v/v) DMSO 5 mM MgCl₂ 5 mM CaCl₂

* 適合性は Profinity eXact コントロールライセートを使用して決定されます。過硫酸アンモニウムのような、一部の試薬はプロテインに依存します。
** 塩素イオンが標的プロテインの切断を誘発。

Boronate アプリケーション

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製品カテゴリー

Nuvia™ IMAC Metal Affinity Resin
Nuvia IMAC (immobilized metal affinity chromatography) Resin provides an ultra-high capacity matrix over a wide range of flow rates and pH for process scale chromatography. Get reproducible separation of biomolecules free of contaminants.

プロテイン A 担体
バイオ・ラッドはさまざまな mAb 精製ニーズに応えるプロテイン A 担体を提供しています。UNOsphere SUPrA は、プロセス規模での精製ワークフロー用に設計されています。アフィゲルおよびアフィプレッププロテイン A は純度の高い IgG を精製します。

Profinity IMAC
Profinity IMAC は、リコンビナントヒスチジン (His) タグ付きタンパク質の精製に使用するアフィニティークロマトグラフィー担体です。

Profinity eXact Purification Resin
Profinity eXact 精製樹脂は、アガロースベースのマトリックスに結合されて高度に処理されたスブチリシンプロテアーゼで構成されています。

活性化アフィニティー担体
リガンド固定化用の活性化担体を使用すると、抗体、酵素、抗原などのリガンドをカップリングすることにより、目的のアフィニティーマトリックスを作成できます。

Ready-to-Use アフィニティー担体
ベースマトリックスは、便利なカップリング済みのリガンドとともに使用できます。各リガンドには固有の特異性があり、特定の分子をキャプチャーするために使用できます。

ヘルプ

連絡先 03 6361 7000

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組成	高架橋ポリマー
粒径範囲	53 ～ 61 µm
リガンド	リコンビナントプロテイン A
カップリング化学	エポキシ
pH の作用範囲	3 ～ 11
動的結合能*	30 ± 3 mg/ml (150 cm/hr) 25 ± 2 mg/ml (300 cm/hr) 20 ± 2 mg/ml 450 cm/hr (最小仕様:300 cm/hr で 20 mg/ml)
化学的安定性	10 mM 塩酸 6 M 塩酸グアニジン 0.1 M アルギニン (pH 2.8) 0.1 M クエン酸 (pH 2.8) 0.1 M グリシン (pH 2.8)
Cleaning-In-Place (CIP) 溶液	6 M 塩酸グアニジン 10 mM 塩酸 0.1 M 水酸化ナトリウム 1 M 酢酸/20% エタノール
推奨される移動相速度の範囲	100 ～ 600 cm/hr
温度の安定性	4 ～ 40°°C
輸送条件	20% エタノールに 50% スラリー
保管条件	4 ～ 8°C

アプリケーション	アプリケーションバッファー	分子 - V_o 中	保持分子	溶出バッファー	使用される担体
アデニル酸シクラーゼアッセイ	HEPES pH 7.5 + MgCl₂	cAMP	ATP、AMP、およびアデノシン	0.05 M NaOAc	バイオゲル P-150 Boronate ゲル
尿からのカテコールアミンの分離	0.1 M リン酸 pH 7.0 + EDTA	その他の尿中成分および DOPA	ノルエピネフリン、エピネフリン	0.025 N HCI	ホウ酸ゲル (シグマ-アルドリッチ)
尿中の変性ヌクレオシド	0.25 M NH₄OAc、pH 8.8	チミジン、アデニン	プソイドウリジン	0.1 M HCOOH	バイオゲル P-2 ゲル、200 ～ 400 メッシュ、Boronate
単糖類およびオリゴヌクレオチドの分離	トリエチルアンモニウム	デオキシリボ核酸	リボヌクレオチド	H₂O およびその他	ジヒドロキシボリルメタクリル酸
糖	0.05 M N-メチル-モルホリニウム-Cl、pH 7.5 + 1 M NaOAc	エリトリトール、アドニトール、スクロース、および D-グルコース	L-アラビニトール、キシリトール、D-マンニトール、ズルシトール、ソルビトール、および D-フルクトース*	イソクラティック分析、溶出バッファー (アプリケーションバッファーと同様)	ジヒドロキシボリルセルロース
リボヌクレオチド還元酵素のアッセイ	トリス、MgCl₂	dUMP、dCMP	CDP	クエン酸	ジヒドロキシボリルセルロース Dowex 1(AG) 樹脂

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